Descripción del producto
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Los estreptococos del grupo D poseen el antígeno del ácido lipoteicoico del grupo D en sus paredes celulares. Las especies del antiguo grupo D, que son habitantes normales predominantes del tracto gastrointestinal humano, se denominan estreptococos fecales o enterococos. La capacidad única de los enterococos para hidrolizar la esculina fue descrita por Meyer y Schonfeld. Los enterococos y los estreptococos del grupo D hidrolizan la esculina en esculetina y dextrosa, que reacciona con citrato férrico produciendo un precipitado marrón negruzco. El uso de la hidrólisis de la esculina para la identificación de enterococos fue citado por primera vez por Rochaix. El agar bilis-esculina fue formulado originalmente por Swan para el aislamiento e identificación de estreptococos del grupo D en alimentos. Facklam y Moody informaron además que, utilizando el agar bilis-esculina, los estreptococos del grupo D podían diferenciarse de los estreptococos que no pertenecían al grupo D. También se ha demostrado que el agar bilis-esculina ayuda a diferenciar Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter y Serratia de otros géneros de Enterobacteriaceae basándose en la hidrólisis de la esculina. Sin embargo, se deben realizar otras pruebas, como la tolerancia a la sal, para identificar Enterococos. El agar bilis-esculina-azida es una modificación del agar bilis-esculina según Isenberg. En este medio, la concentración de bilis se reduce y se incorpora azida sódica adicional.
Si el medio se dispensa en tubos en forma de tubos inclinados, una reacción positiva se indica por el ennegrecimiento de más de la mitad del tubo inclinado en 24-48 horas. Si el ennegrecimiento está totalmente ausente o si menos de la mitad del tubo inclinado se ennegrece en 24-48 horas, la prueba es negativa. Los estreptococos viridans a veces presentan una reacción positiva débil. Asimismo, las especies de Leuconostoc, Pediococcus y Lactococcus que causan infecciones humanas dan una prueba de bilis-esculina positiva. Para potenciar el crecimiento de enterococos, el agar bilis-esculina puede suplementarse con 50 ml/l de suero de caballo.
Las muestras de agua sospechosas se filtran con filtros de membrana. Estos filtros se colocan asépticamente en medio de Slanetz y Bartely. Las colonias de color rojo o granate observadas tras la incubación se confirman transfiriendo asépticamente el filtro de membrana a una placa de agar bilis-esculina-azida precalentada a 44 °C. Tras la inoculación, se incuba a 44 ± 0,5 °C durante 2 horas. Todas las colonias típicas que presentan una coloración marrón negruzca en el medio circundante se consideran enterococos intestinales. Alternativamente, el agar bilis-esculina-azida también puede utilizarse para el aislamiento directo de enterococos (sin filtro de membrana), mediante incubación a 35-37 °C durante 18-24 horas.
